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技術服務

原位雜交-武漢貝科新肽公司-植物原位雜交

武漢貝科新肽科技有限公司

  • 主營產品:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
  • 公司地址:湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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信息詳情
原位雜交法是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行定量定位的方法。原位雜交法可以在細胞標本或組織標本上進行。另有熒光原位雜交使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。











原位雜交技術的技術流程

原位雜交技術的技術流程包括樣本處理、探針制備、雜交反應和信號檢測等步驟。樣本處理包括組織或細胞的固定、包埋、切片和脫氧核糖核酸酶消化等步驟,目的是保持組織或細胞的原始結構和核酸序列的完整性。探針制備包括標記探針、純化和變性等步驟,目的是提高探針的特異性和敏感性。雜交反應包括預雜交、雜交和洗脫等步驟,目的是使探針與目標核酸序列形成雙鏈復合物。信號檢測包括顯色反應、熒光染色和性同位素標記等步驟,目的是可視化目標核酸序列的分布。



植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個方面:

1. 制備組織樣品:從植物中取出需要研究的組織樣品,如根、莖、葉等。

2. 固定組織樣品:將組織樣品固定在載玻片上,通常使用或乙醇等化學物質進行固定。

3. 處理組織樣品:對固定的組織樣品進行脫水、透明化、脫脂等處理,以便于DNA探針的穿透和結合。

4. 制備DNA探針:根據需要研究的基因序列,設計并合成DNA探針。DNA探針可以標記熒光染料或性同位素,以便于檢測。

5. 雜交DNA探針:將DNA探針與組織樣品進行雜交,通常需要在高溫下進行,以便于DNA探針與RNA或DNA結合。

6. 檢測雜交信號:通過熒光顯微鏡或計數器等設備,檢測DNA探針與RNA或DNA的結合情況,確定目標基因的表達模式和位置。





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